ठोस चरण रेजिन से पेप्टाइड्स को साफ़ करने की दो विधियाँ

ठोस चरण एफएमओसी पेप्टाइड्स को रासायनिक रूप से संश्लेषित करने के बाद, दरार के कई तरीके हैं। अब हम आम तौर पर सभी द्वारा उपयोग किए जाने वाले दो बुनियादी प्रकारों का परिचय देंगे।

सूखी राल को शेकर फ्लास्क में रखें और उचित मात्रा में स्कैवेंजर (स्केवेंजर्स) क्लीविंग अभिकर्मक ट्राइफ्लूरोएसिटिक एसिड (टीएफए), 10-25 मि.ली./ग्राम राल डालें, ढकें और कमरे के तापमान पर रुक-रुक कर हिलाएं। नए टीएफए के साथ राल को फ़िल्टर करें राल को 2-3 बार धोएं, फ़िल्टर को मिलाएं, और ग्लेशियल ईथर की 8-10 गुना मात्रा को बूंद-बूंद करके डालें। कभी-कभी इसके कुछ भाग को टीएफए से वाष्पित किया जा सकता है। एक क्रूड पेप्टाइड अवक्षेप प्राप्त किया गया था। वर्षा दक्षता में सुधार के लिए डायथाइल ईथर को बर्फ से ठंडा किया जा सकता है। अंत में, अवक्षेपित कच्चे पेप्टाइड को इकट्ठा करें।

लागू राल:किंग रेज़िन या रिंक एमाइड रेज़िन

1% टीएफए:

1 ग्राम पॉलीपेप्टाइड {{1}हैंगिंग रेज़िन को 1% टीएफए युक्त घोल में मिलाया गया था, डाइक्लोरोमेथेन घोल ग्लास शेक फ्लास्क को सील कर दिया गया था और 2 मिनट के लिए हिलाया गया था। 10% पाइरीडीन युक्त एक अन्य नए मेथनॉल शेक फ्लास्क में निस्यंद डालने के लिए नाइट्रोजन का उपयोग करें। उपरोक्त ऑपरेशन को 10 बार दोहराएं। 30 मिलीलीटर डीसीएम, 30 मिलीलीटर मीओएच का उपयोग करें शेष संरक्षित पेप्टाइड्स को राल पर क्रमिक रूप से तीन बार धोएं। टीएलसी या एचपीएलसी द्वारा सफाई अवशेषों की जांच करें। सभी निस्पंद को मिलाएं और 5% मात्रा छोड़ने के लिए कम दबाव में विलायक को वाष्पित करें। वर्षा में सहायता के लिए 40 मिलीलीटर पानी मिलाएं, और बर्फ-मिश्रण को ठंडा करें। छानने के बाद, उत्पाद को साफ पानी से तीन बार धोएं और उपयोग के लिए वैक्यूम सुखाने वाले बॉक्स में रखें। KOH या P2O5 सूखने दें।

पतला एसिटिक एसिड:

AcOH/TFE/DCM (2:2:6) का उपयोग करें। राल पर लटके पेप्टाइड्स को 2 घंटे के लिए काटने वाले घोल से उपचारित करें, राल को फ़िल्टर करें, और राल को काटने वाले घोल से तीन बार धोएं। मिश्रित निस्यंद में n-हेक्सेन की मात्रा का 15 गुना जोड़ें, और अतिरिक्त एसिटिक एसिड को हटाने के लिए रोटरी वाष्पीकरण करें। पेप्टाइड पुनर्प्राप्ति विधियों का विवरण नीचे दिया गया है।

लागू राल:2- सीटीसी रेज़िन